骨髓基质细胞（BMSC）在调控造血、组织修复及一些疑难疾病的治疗中具有重要意义。然而BMSC并不具备典型形态特征，且骨髓涂片中数量甚少，传统的wright-Giemsa法染色后于普通光镜下不易识别。应用单克隆抗体技术结合流式细胞仪、免疫细胞化学染色、荧光标记技术等可将其鉴别，但亦各有其局限性。固紫B盐是一种棕黄色偶氮染料。常用于细胞化学染色法，主要应用于偶氮偶联法中性粒细胞碱性磷酸酶染色。

分子式：C30H28Cl4N6O4Zn分子量：743.78CAS号：14726-28-4外观：浅黄棕色至黄棕色结晶或粉末可溶性：易溶于水

固紫B盐应用于BMSC的特异性细胞化学染色方法。该方法简便快速，整个操作过程仅需30 min，染色明显，对陈旧标本也易着色，染色液配置后可较长时间保存，染色结果保留数月也不褪色，表明固紫B盐对BMSC染色具有较高的稳定性、特异性。

◆应用

可作为染料，对细胞进行染色，

可用于：细胞中的碱性磷酸酶染色；骨髓基质细胞的染色。

◆实验步骤

1. 标本采集

吸取患者骨髓、胸腔积液或腹腔积液50 μL制成涂片。

2. 溶液配制

固定液：95％乙醇溶液34.5 mL，40％甲醛溶液5.5 mL，蒸馏水1 mL混合而成；

1 g/L固紫B盐PBS溶液：50 mg固紫B盐粉末溶于50 mL PBS溶液，pH 7.2~7.6，4℃下保存；

苏木精复染液：苏木精2 g溶于250 mL无水乙醇中，硫酸铝10 g溶于750 mL蒸馏水中，两种溶液混合后加热煮沸2 min，再加入0.5 g碘酸钠和1 g柠檬酸，混匀。

3. 固紫B盐染色

上述新鲜干燥标本于固定液固定30 s，小水流冲洗后晾干，置入1 g/L固紫B盐PBS溶液（pH 7.2~7.6），37℃水浴箱内置30 min，流水冲洗1 min，晾干后苏木精复染2 min，流水冲洗，待干。镜下观察细胞的着色情况及阳性BMSC形态特征。

◆染色效果

a~d图箭头所示为骨髓基质细胞胞质染为紫红色，胞核不着色，而其他细胞均无此染色特征（固紫B盐染色x1000）

PBS(-)PBS缓冲液 Hematoxylin Monohydrate
苏木精—水合物 Aluminium Sulfate
硫酸铝 Sodium lodate
碘酸钾Citric Acid柠檬酸
固紫B盐
甘氨胆酸钠
甘氨酰-脯氨酰-对硝基苯胺对甲苯磺酸盐
Z-甘氨酰脯氨酸对硝基苯胺
3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐一水合物（MBTH）
6-甲氧基喹啉
肌苷酸二钠
甲基乙烯基醚/马来酸酐共聚物
2-甲氧基-4-吗啉基重氮苯氯化锌盐(2:1)
鲁米诺
氯化硝基四氮唑兰（NBT）
3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷(AMPPD)
磷酸肌酸二钠盐
鲁米诺钠盐
2,2'-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐
2-氯-4-硝基苯-α-L-岩藻糖苷 (CNP-AFU ).

以上内容来自小编zzj 2021.1.29