一、 概述:
分支杆菌索状因子TDM(trehalose-6,6’-dimycolate)能够与巨噬细胞C-型凝集素受体(CLR)MINCLE结合引起下游通路变化。本文对TDM处理的巨噬细胞磷酸化蛋白质组进行定量分析,发现了依赖于MINCLE的信号通路和MINCLE非依赖的信号通路,两种信号通路具有不同的生物功能。
二、 研究背景:(简要介绍研究进展动态、研究目的和意义)
巨噬细胞对分支杆菌的识别依赖于TLR、CLR以及分支杆菌核酸。TDM是细胞壁主要的糖脂,能够诱导分支杆菌与宿主的相互作用。TDM和它的合成类似物TDB能够直接与MINCLE结合,激活的CLR可以进一步激活SYK激酶。目前没有关于SYK耦合的CLR刺激巨噬细胞的磷酸化蛋白研究,本文利用野生型小鼠和MINCLE缺陷型小鼠研究了TDM诱导的巨噬细胞蛋白磷酸化和转录组的变化。
三、实验设计:
四、研究成果:
1、TDM/TDB诱导SYK/MAPK激活和细胞因子表达依赖于MINCLE
2、TMD诱导巨噬细胞磷酸化蛋白组学分析
共鉴定到14173条磷酸化肽段,3727个磷酸化蛋白。TDM导致846条上调磷酸化肽段,484条下调磷酸化肽段。野生型与MINCLE缺陷型TDM刺激的巨噬细胞相比,641条磷酸化肽段上调,388条磷酸化肽段下调。
3、TDM诱导的蛋白磷酸化有MINCLE依赖和非依赖两种形式
两种形式的蛋白磷酸化具有不同的细胞分布和生物学功能。MINCLE依赖的蛋白磷酸化与转录及细胞因子分泌相关,MINCLE非依赖的蛋白磷酸化与细胞周期相关。
两种形式的蛋白磷酸化能激活不同的下游通路。
4、转录组学分析表明MINCLE依赖和非依赖具有不同的基因表达
转录组学进一步验证不是所有TDM引起的通路变化是MINCLE依赖的。
文章亮点
本文从磷酸化蛋白组和转录组揭示了巨噬细胞对CLR的应答反应,并发现索状因子刺激后的巨噬细胞信号通路具有MINCLE依赖和非依赖的形式。TDM-MINCLE通路能够引起下游细胞因子的分泌,MINCLE非依赖的信号通路能够调节细胞周期的变化。两种形式的信号通路具有不同的生物功能,表明分支杆菌和巨噬细胞的相互作用值得进一步研究。