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iPS细胞培养新方法 可减少移植引发感染症风险
2014年01月13日报道,日本京都大学日前发表一份公报称,其研究小组开发出一种新方法,可以简单地培养诱导多功能干细胞(iPS细胞),同时减少移植过程中引发感染症的风险。
日本京都大学日前发表一份公报称,其研究小组开发出一种新方法,可以简单地培养诱导多功能干细胞(iPS细胞),同时减少移植过程中引发感染症的风险。
迄今为止,在培养iPS细胞时,需要使用含有实验鼠饲养细胞和牛血清的培养液补充营养。但是,在利用这种iPS细胞培养出的组织和细胞时,来自动物的感染症有可能感染人体,且测试其安全性也耗时很长。
京都大学iPS细胞研究所的山中伸弥和中川诚人等研究人员注意到,一种叫做“Laminin-511”的蛋白质能把细胞粘结在一起,于是利用这种蛋白质的片段“Laminin-511E8”(LN511E8)制作出培养基,发现iPS细胞能够在培养皿上牢固“扎根”。为取代动物成分,研究小组还制作出添加了氨基酸和维生素的培养液,这样能增加安全性更高的iPS细胞的数目。
由于此次开发出的方法不使用动物成分,可以减少确认安全性的实验程序,简单高效,有望使iPS细胞早日在再生医疗领域实现临床应用。
研究小组还发现,利用新方法制作的人类iPS细胞,能够发育为可产生神经传导物质多巴胺的神经细胞、能制造胰岛素的细胞以及血液细胞等,有望用于治疗帕金森氏症和糖尿病等疾病。
研究小组还利用这种新方法成功培育了与iPS细胞拥有同样能力的胚胎干细胞(ES细胞)。这一成果的论文已刊登在新一期英国《科学报告》杂志上。
Nature子刊:如何更好地培养iPS细胞
2014年06月26日,目前人类诱导多能干细胞(hiPSC)的培养条件虽然有助于维持细胞的多能性,但也可能引入污染物,大大限制了这些细胞在临床上的应用。为此,日本RIKEN的研究团队找到了一个更好的hiPSC培养方案。他们发现,一种参与免疫应答的趋化因子CCL2能够替代干细胞培养中的传统生长因子,增强干细胞的多能性。
干细胞能够分化成为机体内的任何细胞类型。日本科学家山中伸弥(Shinya Yamanaka)开发的诱导多能干细胞技术,可以将成熟细胞重编程为多能细胞,使其回到类似干细胞的状态,重新获得强大的分化能力。这一技术在再生医学领域有着广阔的应用前景,被视为细胞替代疗法的新希望。
然而,目前人类诱导多能干细胞(hiPSC)的培养条件虽然有助于维持细胞的多能性,但也可能引入污染物,大大限制了这些细胞在临床上的应用。
为此,日本RIKEN的研究团队找到了一个更好的hiPSC培养方案。他们发现,一种参与免疫应答的趋化因子CCL2能够替代干细胞培养中的传统生长因子,增强干细胞的多能性。这一成果发表在Nature旗下的Scientific Reports杂志上。
培养hiPSC的标准方法需要用bFGF(碱性成纤维细胞生长因子)来维持其多能状态。在这样的培养条件下,hiPSC其实更接近于外胚层干细胞(epiblast stem cell),而不是真正的胚胎干细胞。
研究人员将培养基中的bFGF换成CCL2进行研究。他们发现,CCL2也能够激活JAK/STAT通路,该通路与免疫应答和多能干细胞的维持有关。研究显示,用CCL2进行培养会增强多能性标志基因的表达。
为了全面理解CCL2的作用机制,研究人员分别用CCL2和bFGF培养hiPSC,并对二者的转录组进行了比较分析。他们发现,在CCL2培养的干细胞中,低氧应答的相关基因表达水平更高,比如HIF2A (EPAS1)。这说明CCL2通过诱导类似低氧应答的反应,增强干细胞的多能性。这一发现将吸引研究者们,进一步探索细胞压力(例如低氧)与细胞多能性增强之间的关系。
领导这项研究的Yuki Hasegawa指出,“我们发现,表达差异最为显著的基因与低氧应答有关。事实上,低氧在肿瘤发展和多能性维持中的确有着重要的作用。我们的这项研究可以帮助人们进一步提高iPSC的质量,推动这些细胞在再生医学和疾病研究中的应用。”
研究还显示,与bFGF相比,CCL2培养的hiPSC分化效率更高。人们可以利用CCL2实现无滋养层细胞的hiPSC培养,防止病毒或其它污染物对干细胞产生影响。为了更好的利用CCL2,培养质量更加稳定的人类iPSC,研究人员还开发了一种特殊的培养皿,其上覆盖着连有CCL2的微珠。
日本研发新型iPS细胞培养技术 培养速度是目前的十倍
2017-02-10 人民网报道,人民网东京2月10日电 据《朝日新闻》报道,日本京都大学和大阪GUNZE株式会社的研究团队近日成功开发出一种新的iPS细胞及胚胎干细胞(ES细胞)培养技术,培养速度是目前的十倍。
利用iPS细胞制作组织和器官需要培养大量细胞。然而,目前在培养皿中的培养量较小,在容器中加入多量的培养液加以搅拌的方法效率又比较低。
该研究团队的龟井谦一郎特定副教授等人使用明胶等,开发出了一种极细的布状纤维材料。将iPS细胞放在这种材料中培养,可在短时间内培养出高品质的iPS细胞。这种方法可将培养时间缩短至当前的五至十分之一,也可节约成本。龟井谦一郎表示:“今后会考虑增大这种材料的面积,以期实际投入使用。”
当然,如果要进行IPS细胞重编程也是灰常方便的,
实验涉及原代细胞培养、电转、鉴定、支原体检测等等各种实验,
涉及的实验主要有以下产品清单:点击蓝字直接查看详情
货号 | 中文名称 | 包装量 | 单位 |
GP011020 | iPS细胞重编程质粒套装 | 20次 | 支 |
货号 | 中文名称 | 包装量 | 单位 |
MP015100 | 皮肤成纤维细胞生长培养基 | 100ml | 瓶 |
MP015500 | 皮肤成纤维细胞生长培养基 | 500ml | 瓶 |
MP025100 | 尿液细胞生长培养基 | 100ml | 瓶 |
MP025500 | 尿液细胞生长培养基 | 500ml | 瓶 |
货号 | 中文名称 | 包装量 | 单位 |
AAB-1001 | LONZA Amaxa电转仪 | 1 | 台 |
货号 | 中文名称 | 包装量 | 单位 |
KN015005 | PBMC电转重编程试剂盒 | 5次 | 包 |
KN015025 | PBMC电转重编程试剂盒 | 25次 | 包 |
KN025005 | 皮肤成纤维细胞电转重编程试剂盒 | 5次 | 包 |
KN025025 | 皮肤成纤维细胞电转重编程试剂盒 | 25次 | 包 |
KN035005 | 尿液细胞电转重编程试剂盒 | 5次 | 包 |
KN035025 | 尿液细胞电转重编程试剂盒 | 25次 | 包 |
货号 | 中文名称 | 包装量 | 单位 |
PG012010 | 重组人FGF2/bFGF | 10ug | 支 |
PG012100 | 重组人FGF2/bFGF | 100ug | 支 |
PG013001 | 重组人FGF2/bFGF | 1mg | 支 |
PR012005 | 重组人LIF蛋白 | 5ug | 支 |
PR012020 | 重组人LIF蛋白 | 20ug | 支 |
PR012100 | 重组人LIF蛋白 | 100ug | 支 |
PR022010 | 重组人Activin A蛋白 | 10ug | 支 |
PR022050 | 重组人Activin A蛋白 | 50ug | 支 |
PR032005 | 重组人Noggin/NOG蛋白 | 5ug | 支 |
PR032020 | 重组人Noggin/NOG蛋白 | 20ug | 支 |
PR032100 | 重组人Noggin/NOG蛋白 | 100ug | 支 |
货号 | 中文名称 | 包装量 | 单位 |
PA012050 | 兔抗人Oct4多抗 | 50ul | 支 |
PA012100 | 兔抗人Oct4多抗 | 100ul | 支 |
PA012200 | 兔抗人Oct4多抗 | 200ul | 支 |
PA022050 | 兔抗人Nanog多抗 | 50ul | 支 |
PA022100 | 兔抗人Nanog多抗 | 100ul | 支 |
PA022200 | 兔抗人Nanog多抗 | 200ul | 支 |
货号 | 中文名称 | 包装量 | 单位 |
GQ011001 | 人Oct4 qPCR引物对 | 1nmol | 支 |
GQ021001 | 人Nanog qPCR引物对 | 1nmol | 支 |
GQ031001 | 人GAPDH qPCR引物对 | 1nmol | 支 |
GQ041001 | 人PAX6 qPCR引物对 | 1nmol | 支 |
GQ051001 | 人FOXA2 qPCR引物对 | 1nmol | 支 |
GQ061001 | 人MSX1 qPCR引物对 | 1nmol | 支 |
货号 | 中文名称 | 包装量 | 单位 |
BF012050 | Leucosep 12ml PBMC分离管 | 50个 | 包 |
BF013500 | Leucosep 12ml PBMC分离管 | 500个 | 箱 |
BF022025 | Leucosep 50ml PBMC分离管 | 25个 | 包 |
BF023250 | Leucosep 50ml PBMC分离管 | 250个 | 箱 |
货号 | 中文名称 | 包装量 | 单位 |
KM012020 | 染色法支原体检测试剂盒 | 20次 | 盒 |
KM022048 | PCR法支原体检测试剂盒 | 48次 | 盒 |
KM032010 | 发光法支原体检测试剂盒 | 10次 | 盒 |