2019文献阅读1-1，Fangfang Wang， 浙江大学，PNAS，9.5
1. 背景
- 多囊卵巢综合征（PCOS）是最常见的女性内分泌疾病之一，也是女性不孕症的主要原因。
- PCOS病理生理学的潜在机制仍有待阐明。
2. 科学问题
- 探索PCOS 的发病机制
3. 过程
- 高雄激素血症与PCOS 往往共发，所以作者猜测高雄激素血症是PCOS的病因
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120 control,68 case，从卵巢颗粒细胞进行RNA 测雄激素受体，发现两种剪接变体
B. 一种是外显子2和3之间插入69bp碱基，另一种是删除外显子3
C. 变体分布
D-G. mRNA 表达水平
H. AR变体蛋白质结构的最佳预测3D模型
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接着作者想看看这两个剪接变体是否与PCOS女性的临床特征相关
image.png - 然后作者又想探索一下这个剪接变体的来源，做了基因测序
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测序外显子2和侧翼内含子的约100 bp的，以及外显子3和侧翼内含子〜2kb的，发现一个杂合突变
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因为外显子 - 内含子边界的差异甲基化，也在剪接调节中起作用，所以作者又做了甲基化测序，发现两个甲基化位点。
image.png - 接着作者又做这个剪切变体的功能研究，发现剪切变体后的AR，招募基因能力变弱
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关于机制方面的，看的不是很明白，还需要加强
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- 接着做转录组测序发现，AR 剪接变体显著改变了下游基因的表达，且改变的基因与卵泡发育及雄激素代谢相关。
- 通过分子生物实验得出，AR 剪接变体通过脱抑制雄激素向雌激素转化的限速酶-芳香化酶的转录，从而抑制了雄激素的代谢； 并且促进卵巢颗粒细胞中雄激素合成的关键酶——17α 羟化酶的表达， 从而促进雄激素的合成， 最终引起 PCOS 中高雄症的发生。 该项研究揭示了 PCOS 发病的表观遗传学新机制，成果为 PCOS 的诊断治疗提供新的路径。
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AR 剪接变体既往在雄激素受体不敏感综合征及前列腺癌的患者中发现，这是继该两种疾病之后，首次在女性体内发现 AR 剪接变体； 并且发现 AR剪接变体不单纯地表现为雄激素受体的功能减弱，并且存在不同于野生型 AR 的功能，意义重大。
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总结
- 全文思路清晰，发现剪切变体，从上游基因和甲基化测序寻找这个变体的来源，下游验证这个变体的功能，最后得出结论雄激素代谢是PCOS的病因之一。故事完整，证据有力。
- 创新点：
- 取样为卵巢颗粒细胞，样本有特色
- 总之，好文章不是样本量堆砌出来的，需要有很强的科学嗅觉，以及后期严谨的验证环节。大胆猜想，小心求证